臨床生物化學(xué)/主要實(shí)驗(yàn)參數(shù)的選擇（設(shè)置）
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一般自動(dòng)分析儀有12個(gè)主要數(shù)據(jù)，即波長、溫度、標(biāo)本及試劑量、空白時(shí)間（Tb）、開始收集實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)時(shí)間（Ti）、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)收集窗時(shí)間（TW）、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)收集完成時(shí)間（Td）和最后時(shí)間（Tf）、速率時(shí)間（Tr）、線性限度（L）、異常吸收率（ABN）、曲線擬合、濃度因素（F）。這些參數(shù)都是通過方法學(xué)的研究之后，根據(jù)反應(yīng)的具體情況加以確定的。
（一）波長
根據(jù)分光亮度計(jì)的光吸收曲線或者一個(gè)比色杯不同波長的反應(yīng)曲線選擇分析波長和空白波長。對快速反應(yīng)，以光吸收曲線的低凹區(qū)波長為空白波長，光吸收曲線中吸亮度最大而較平坦區(qū)的波長為分析波長。
（二）溫度
一般均選用30℃。
（三）樣品量及試劑量
可根據(jù)手工法按比例縮減或者重新設(shè)計(jì)。要考慮到檢測靈敏度、線性范圍，盡可能將樣品稀釋倍數(shù)大些，以降低樣品中其它成分的影響。
（四）分析時(shí)間的確定
用高、中、低濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)用研究模式，進(jìn)行酶促反應(yīng)時(shí)間曲線或反應(yīng)速度時(shí)間曲線的觀察，根據(jù)吸收率動(dòng)態(tài)變化的具體數(shù)據(jù)，確定有關(guān)的分析時(shí)間。
⒈Tb 終點(diǎn)法，吸光度上升型，一般選擇反應(yīng)尚示開始而試劑和樣品已充分混合均勻，一般定為4秒。動(dòng)態(tài)法的Tb＝Ti。
⒉Ti 終點(diǎn)法選擇反應(yīng)接近平衡期，動(dòng)態(tài)法則選擇接近進(jìn)入線性期。這個(gè)參數(shù)不很嚴(yán)格。如果Ti定的太早，過多的不符合要求的數(shù)據(jù)點(diǎn)將舍棄。Ti定的太晚，數(shù)據(jù)收集時(shí)間就要延長，在動(dòng)態(tài)法還可能使底物耗盡的發(fā)生機(jī)會(huì)增多。在終點(diǎn)法Ti大致定于Tf的70％或接近于反應(yīng)完全時(shí)，動(dòng)態(tài)法確定Ti時(shí)，主要考慮避開酶反應(yīng)的延遲期以及試劑和樣品混合后溫度不平衡期。
⒊TW 根據(jù)高、中、低濃度標(biāo)準(zhǔn)液反應(yīng)速度時(shí)間曲線加以確定。要求各標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度變化在該時(shí)間內(nèi)均在線性判斷標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)。終點(diǎn)法一般為4-10秒。在動(dòng)態(tài)法中，為了使反應(yīng)不出現(xiàn)未反應(yīng)（NR）的標(biāo)志，在Tb與Tf之間至少有8mA的吸收率變化。在快速反應(yīng)時(shí)，TW從30秒開始，按10秒向上遞增。在慢反應(yīng)可達(dá)120秒。TW不應(yīng)太長，否則可以偏離線性，也減低工作效率。
⒋Tr Tr值的大小對方法的精密度有較顯著的影響。為了保證方法的精密度，使△A＞1.0mA是必要的。如Tr時(shí)間短，△A太小，測定方法的精密度就降低。一般情況下，Tr定為20-60秒。在現(xiàn)有程序中，是以正常低值標(biāo)本的△A＞1mA來決定Tr值。如ALT測定，正常低值為7u/L，Tr＝7u/L/2.57＝2.7mA/60秒，30秒＝1.35mA，故選30秒為Tr時(shí)間。
（五）線性判斷標(biāo)準(zhǔn)（線性限L）
指在數(shù)據(jù)收集窗時(shí)間內(nèi)吸收率變化的允許范圍。作為終點(diǎn)法，從理論上講，化學(xué)反應(yīng)達(dá)到平衡（終點(diǎn)），吸光度應(yīng)該穩(wěn)定不變，也就是說，在TW內(nèi)吸收率變化應(yīng)該是零，即線性判斷標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)該定為零。在實(shí)際中，由于信號(hào)有一定的飄移，更主要是測定要求快速，是在反應(yīng)還沒真正到達(dá)終點(diǎn)時(shí)進(jìn)行測定，加上自動(dòng)分析儀檢測的靈敏度大多較高，精度可達(dá)到0.1mA，所以在TW期間的吸收率會(huì)有一定的波動(dòng)。不同的化學(xué)反應(yīng)或酶促反應(yīng)，吸光度變化程度不一。要根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇一個(gè)適當(dāng)?shù)奈舛茸兓秶鳛榫€性判斷標(biāo)準(zhǔn)，以此來判定反應(yīng)是否達(dá)到了平衡。這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)值如果定的太小，反應(yīng)也很難達(dá)到要求的標(biāo)準(zhǔn)，出現(xiàn)非線性的機(jī)會(huì)太多，或者要延長觀測時(shí)間，降低工作效率，這就不符合快速分析的要求。相反，這個(gè)線性判斷標(biāo)準(zhǔn)定的太大，就失去了判斷線性的意義，出現(xiàn)反應(yīng)根本沒有達(dá)到終點(diǎn)就錯(cuò)誤地判為達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，影響測定結(jié)果的可靠性。在終點(diǎn)法中，L單位是mA/2秒，大多選用1.0mA/2秒。如出現(xiàn)反應(yīng)不完全，可按0.5mA順序增加。在動(dòng)態(tài)法中，L單位是mA/秒，一般從0.1mA/秒開始，如果試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)非線性（NL）情況多，可以增大，按0.01mA遞增，但不可超過0.1mA。
（六）異常吸收率限度
這一參數(shù)主要根據(jù)每個(gè)法實(shí)驗(yàn)測定的線性范圍來確定。即用吸光率作為縱軸，標(biāo)準(zhǔn)液濃度為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。這個(gè)線性段向非線性段轉(zhuǎn)折拐點(diǎn)的相應(yīng)吸收率值即為異常吸收率限度。終點(diǎn)法吸收率超過此值被標(biāo)志為超出限度（XL）。在動(dòng)態(tài)法中，試劑空白的吸收率超過ABN，ABN被標(biāo)志為試劑吸收率異常（AB），測定杯的吸收率超過ABN時(shí)，ABN被標(biāo)志為底物耗盡（EX）。
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