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臨床生物化學(xué)/電泳技術(shù)的基本原理和分類

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臨床生物化學(xué)

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在電場中,推動帶電質(zhì)點運動的力(F)等于質(zhì)點所帶凈電荷量(Q)與電場強(qiáng)度(E)的乘積。

F=QE

質(zhì)點的前移同樣要受到阻力(F)的影響,對于一個球形質(zhì)點,服從Stoke定律,即:

F′=6πrην

式中r為質(zhì)點半徑,η為介質(zhì)粘度,ν為質(zhì)點移動速度,當(dāng)質(zhì)點在電場中作穩(wěn)定運動時:

F=F′即QE=6πrην

上式交換后可寫成

Gopp5d9l.jpg


ν/E的含意為單位電場強(qiáng)度下的移動速度,這里可用遷移率μ表示,即

Gopp5g3a.jpg


從上式可見,球形質(zhì)點的遷移率,首先取決于自身狀態(tài),即與所帶電量成正比,與其半徑及介質(zhì)粘度成反比。除了自身狀態(tài)的因素外,電泳體系中其它因素也影響質(zhì)點的電泳遷移率。

電泳法可分為自由電泳(無支持體)及區(qū)帶電泳(有支持體)兩大類。前者包括Tise-leas式微量電泳、顯微電泳、等電聚焦電泳、等速電泳及密度梯度電泳。區(qū)帶電泳則包括濾紙電泳(常壓及高壓)、薄層電泳(薄膜及薄板)、凝膠電泳瓊脂瓊脂糖、淀粉膠、聚丙烯酰胺凝膠)等。

自由電泳法的發(fā)展并不迅速,因為其電泳儀構(gòu)造復(fù)雜、體積龐大,操作要求嚴(yán)格,價格昂貴等。而區(qū)帶電泳可用各種類型的物質(zhì)作支持體,其應(yīng)用比較廣泛。本節(jié)僅對常用的幾種區(qū)帶電泳分別加以敘述。

32 電泳技術(shù)的應(yīng)用 | 影響電泳遷移率的因素 32
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