毒性噬菌體
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根據(jù)與宿主菌的相互關(guān)系,噬菌體可分成兩種類型:一種是能在宿主菌細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖,產(chǎn)生許多子代噬菌體,并最終裂解細(xì)菌,稱為毒性噬菌體(virulent phage)。另一種是噬菌體基因與宿主菌染色體整合,不產(chǎn)生子代噬菌體,但噬菌體DNA能隨細(xì)菌DNA復(fù)制,并隨細(xì)菌的分裂而傳代,稱為溫和噬菌體(temperate phage)或溶原性噬菌體(lysogenic phage)?! ?/p>
目錄 |
毒性噬菌體增殖過程
毒性噬菌體在敏感菌內(nèi)以復(fù)制方式進(jìn)行增殖,增殖過程包括吸附、穿入、生物合成、成熟和釋放幾個階段。從噬菌體吸附至細(xì)菌溶解釋放出子代噬菌體,稱為噬菌體的復(fù)制周期或溶菌周期?! ?/p>
吸附
吸附是噬菌體與細(xì)菌表面受體發(fā)生特異性結(jié)合的過程,其特異性取決于噬菌體蛋白與宿主菌表面受體分子結(jié)構(gòu)的互補(bǔ)性。不同噬菌體的吸附方式不同,絲形噬菌體以其末端吸附,有尾噬菌體以尾絲、尾刺吸附。絲形噬菌體如M13、f1等及微球形噬菌體如MS2等是吸附于細(xì)菌的性菌毛上,所以只感染有性菌毛的F+菌。只要細(xì)菌具有特異性受體,不論是活或已死亡,噬菌體都能吸附,但噬菌體不能進(jìn)入死亡的宿主菌?! ?/p>
穿入
有尾噬菌體吸附宿主菌后,借助尾部末端含有的一種類似溶菌酶的物質(zhì),在細(xì)菌胞壁上溶一小孔,然后通過尾鞘的收縮,將頭部DNA注入細(xì)菌體內(nèi),而蛋白質(zhì)衣殼留在菌細(xì)胞外。無尾噬菌體與絲形噬菌體可以脫殼的方式進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)。
生物合成
噬菌體核酸進(jìn)入菌細(xì)胞后,一方面通過轉(zhuǎn)錄形成mRNA,再由此轉(zhuǎn)譯成噬菌體所需的,與生物合成有關(guān)的酶、調(diào)節(jié)蛋白和結(jié)構(gòu)蛋白。另一方面, 以噬菌體核酸為模板,通過核酸多聚酶的催化作用,大量復(fù)制子代噬菌體的基因核酸?! ?/p>
成熟與釋放
待噬菌體的蛋白質(zhì)與基因核酸分別合成后,立即在細(xì)菌胞質(zhì)內(nèi)按一定程序裝配成完整的成熟噬菌體。當(dāng)子代噬菌體達(dá)到一定數(shù)目時,菌細(xì)胞突然裂解,釋放出的噬菌體又可感染新的敏感細(xì)菌。但有些絲形噬菌體是以出芽的方式逐個釋放?! ?/p>
噬菌體數(shù)量的測定
在液體培養(yǎng)基中,噬菌現(xiàn)象可使混濁菌液變?yōu)槌吻?。?a href="/w/%E5%9B%BA%E4%BD%93%E5%9F%B9%E5%85%BB%E5%9F%BA" title="固體培養(yǎng)基">固體培養(yǎng)基上,若用適量的噬菌體和宿主菌液混合后接種培養(yǎng),培養(yǎng)基表面可有透亮的溶菌空斑出現(xiàn)。一個空斑系由一個噬菌體復(fù)制增殖并裂解細(xì)菌后形成,稱為噬斑(plaque),不同噬菌體噬斑的形態(tài)與大小不盡相同。若將噬菌體按一定倍數(shù)稀釋,通過噬斑計(jì)數(shù),可測知一定體積內(nèi)的噬斑形成單位(plaque forming units, pfu)數(shù)目,即噬菌體的數(shù)量。
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