臨床生物化學(xué)/乳酸脫氫酶（LD）及其同工酶
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不同方法測(cè)出LD結(jié)果差異較大，這是因?yàn)長(zhǎng)D有5種不同的同工酶，每種同工酶的最適反應(yīng)條件不同。例如同為催化乳酸變?yōu)?a href="/w/%E4%B8%99%E9%85%AE" title="丙酮">丙酮酸，LD1的最適pH為9.8，而LD5的最適pH為8.8。很難找出一個(gè)測(cè)定血清總LD的最適條件，檢驗(yàn)醫(yī)師在解釋測(cè)定結(jié)果時(shí)應(yīng)加以注意。
LD催化反應(yīng)是無(wú)氧糖酵解的最終反應(yīng)，廣泛存在于人體各組織中，故測(cè)總酶臨床意義不大，但LD是由兩種不同亞基（M，H）組成的四聚體，形成5種結(jié)構(gòu)不同的同工酶，其中H型亞基中酸性氨基酸較多，電泳時(shí)負(fù)電荷多，因此電泳速率較快。按電泳向陽(yáng)極泳動(dòng)快慢，分別命名為L(zhǎng)D1（H4），LD2（H3M），LD3（H2M2），LD4（HM3）和LD5（M4）。
【組織分布】
LD雖廣泛存在于人體各組織中，但是不同組織中同工酶組成有差異，大致可分為三類：一類以LD1為主，心肌為此類代表，LD可占總酶活性50％以上，此外有紅細(xì)胞等。另一類以LD5為主，以橫紋肌為代表，此外有肝臟等。第三類以LD3為主，脾、肺為此類代表。LD主要存在于細(xì)胞質(zhì)中，線粒體中未查到。
血清LD高低和性別關(guān)系不大，嬰兒酶活性可達(dá)成年人兩倍，兒童和少年活性比成年人高10％-15％，血清LD同工酶目前常用電泳法測(cè)定，由于具體方法差異，各學(xué)者報(bào)告的結(jié)果出入較大，但在成年人存在著如下規(guī)律：LD2＞LD1＞LD3＞LD4＞LD5，值得注意的是有學(xué)者報(bào)告，部分正常兒童血中LD1可大于LD2。
【標(biāo)本的采集、處理和貯存】
由于血小板中也含大量LD，血清中和血漿所測(cè)LD有一定差異，一般都選用血清為測(cè)定標(biāo)本，采血后應(yīng)迅速分離血清，因紅細(xì)胞中LD含量比血清高100倍以上，不宜用溶血血清為測(cè)定標(biāo)本。
LD尤其是LD4和LD5與其它酶不同，不是熱變性而是冷變性，在4℃貯存活性下降快于室溫25℃，一般說(shuō)25℃放2-3天LD活性變化不大，有條件者最好還是在采血后24小時(shí)內(nèi)測(cè)定，標(biāo)本應(yīng)貯存于室溫。
【參考值范圍】
根據(jù)催化反應(yīng)方向的不同，有兩大類測(cè)LD方法，一大類為國(guó)際臨床化學(xué)協(xié)會(huì)（IFFC）推薦方法，以丙酮酸為底物，其參考值范圍為80-500U/L（37℃）；另一大類以乳酸為底物，在我國(guó)應(yīng)用較普遍，其參考值范圍為50-150U/L。
【臨床應(yīng)用】
LD及其同工酶是臨床上常用酶之一，尤其是LD同工酶和CK-MB是臨床常規(guī)實(shí)驗(yàn)室最常測(cè)的兩種同工酶。臨床常用于診斷和鑒別診斷心、肝和骨骼肌的疾病。表7-5是LD及其同工酶在這些疾病時(shí)的變化情況。
表7-5 總LD和LD同工酶在疾病的變化
| 疾病 | 總LD | LD同工酶 | |
| AMI | 常測(cè)酶中，升高最慢（8-10h），但升高時(shí)間最長(zhǎng)（5-10d），峰值可達(dá)10倍正常上限 | LD1＞LD2，并可持續(xù)到兩周（部分病例總LD正常） | |
| 充血性心衰，心肌炎 | 可升高達(dá)5倍正常上限 | LD1＞LD2 | |
| 增 | 巨細(xì)胞性貧血 | 可升高達(dá)5倍正常上限，治療正確迅速下降 | LD1＞LD2 |
| 病毒性肝炎 | 部分病例可升高達(dá)5倍正常上限 | LD5＞LD4（部分病例總LD正常 | |
| 肝硬化 | 常輕度升高 | LD5明顯升高，LD5＞LD4 | |
| 高 | 原發(fā)性肝癌 | 部分病例升高 | LD5明顯升高，LD5＞LD4 |
| 梗阻性黃疸 | 不定 | 常LD4＞LD5 | |
| 肌肉損傷 | 視損傷程度不同而異 | 以LD5升高為主 | |
| 肌萎縮 | 可高達(dá)10倍正常上限 | 以LD5為主 | |
| 某些惡性腫瘤（白血病，結(jié)腸癌……） | 可升高，個(gè)別病例高達(dá)5倍正常上限 | 以LD3為主，LD3＞LD1 | |
| 變異 | 某些病倒，電泳出現(xiàn)LD6，常顯示預(yù)后不佳 |
實(shí)用中此酶用于診斷AMI，特別是亞急性AMI。在AMI時(shí)，LD由于分子量較大（125000），在常用酶中升高最遲，但其半壽期較長(zhǎng)，增高持續(xù)時(shí)間可達(dá)5-10天，此時(shí)其它酶活性已恢復(fù)正常，在亞急性AMI診斷上有一定價(jià)值?？上У氖牵琇D總酶診斷AMI的特異性較差，很多其它疾病，此酶都升高。LD同工酶則不同，診斷特異性可達(dá)95％以上，僅次于CK-MB，甚至有學(xué)者認(rèn)為，只要測(cè)此二同工酶，不需作其它酶學(xué)檢查就可診斷AMI。LD同工酶的高特異性是因?yàn)槿梭w各組織器官中LD同工酶的分布情況并不相同，除心肌外，只有少數(shù)器官如紅細(xì)胞中的LD是以LD1為主，絕大多數(shù)的AMI患者血中的LD同工酶都可出現(xiàn)LD1＞LD2變化，即所謂的“反轉(zhuǎn)”（flip）類型變化，其持續(xù)時(shí)間甚至可超過(guò)總LD升高時(shí)間，達(dá)兩周之久。臨床上可見(jiàn)部分患者在恢復(fù)期，所有酶活性都降至正常，但仍有“反轉(zhuǎn)”類型的LD同工酶變化，這些患者常有復(fù)發(fā)傾向，除AMI和心肌損傷，此種“反轉(zhuǎn)”類型變化還見(jiàn)于溶血性貧血和巨細(xì)胞性貧血，但此類疾病在臨床上不難與AMI相區(qū)分。
60年代臨床上曾經(jīng)用過(guò)所謂“α-羥丁酸脫氫酶”的測(cè)定來(lái)診斷AMI。實(shí)際上并不存在這種酶，所測(cè)的主要是LD1的活性，目前國(guó)外已較少測(cè)定此酶而改用更精確的測(cè)LD同工酶的方法。
其次，LD及其同工酶常用于肝臟疾病的診斷和鑒別診斷，由于肝細(xì)胞中主要為L(zhǎng)D1，在肝實(shí)質(zhì)病變時(shí)常出現(xiàn)LD5＞LD4，但由于正常血清中LD5含量很少，不少病例就是出現(xiàn)同工酶異常LD5＞LD4時(shí)，總LD活性仍為正常，故LD同工酶檢查陽(yáng)性率遠(yuǎn)高于總LD，一般在膽道疾患或梗性黃疸早期未累及肝實(shí)質(zhì)時(shí)，不出現(xiàn)LD5＞LD4，仍為L(zhǎng)D4＞LD5。值得注意的是，在骨骼肌疾病和損傷時(shí)，也會(huì)出現(xiàn)類似變化，臨床上診斷各型肌萎縮也常測(cè)定LD及LD同工酶，早期常為L(zhǎng)D5升高，但在晚期LD1和LD2也升高。
惡性腫瘤可由于腫瘤細(xì)胞惡性增長(zhǎng)和壞死而引起血清LD升高，如轉(zhuǎn)移到肝臟往往伴有LD4和LD5升高，此外一部分腫瘤，如白血病等常有LD3和LD4的增高。
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