醫(yī)學(xué)微生物學(xué)/大腸桿菌
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大腸細(xì)菌（E. coli）為埃希氏菌屬(Escherichia)代表菌。埃希氏菌屬有6種，只有大腸桿菌是臨床最常見、最重要的一個菌種。所以一般說大腸埃希菌其實就是指大腸桿菌。一般多不致病，為人和動物腸道中的常居菌，在一定條件下可引起腸道外感染。某些血清型菌株的致病性強(qiáng)，引起腹瀉，統(tǒng)稱病致病大腸桿菌。
目錄 |
一、生物學(xué)性狀
（一）形態(tài)與染色
大小0.4～0.7×1～3um,無芽胞,大多數(shù)菌株有動力。有普通菌毛與性菌毛，有些菌株有多糖類包膜，革蘭氏陰性桿菌。
（二）培養(yǎng)特性
在血瓊脂平板上，有些菌株產(chǎn)生β型溶血。在鑒別性或選擇性培養(yǎng)基上形成有顏色、直徑2～3mm的光滑型菌落。
生化反應(yīng)：大部分菌株發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，并發(fā)酵葡萄糖、麥芽胞、甘露醇、木膠糖、阿拉伯膠等產(chǎn)酸產(chǎn)氣。IMViC試驗為“+、+、-、-”。即為典型大腸桿菌。
（三）抗原構(gòu)造
較復(fù)雜，有O、K、H、F四種抗原。O抗原為脂多糖，已有171種，其中162種與腹瀉有關(guān)，是分群的基礎(chǔ)。K抗原有103種，為莢脂多糖抗原。從病人新分離的大腸桿菌多有K抗原，有抗吞噬和補(bǔ)體殺菌作用。根據(jù)耐熱性等不同，K抗原分為L、A、B三種，其中L、B不耐熱，有60種。F抗原至少有5種，與大腸桿菌的粘附作用有關(guān)、表明大腸桿菌血清型的方式是按O：K：H排列，例如O111：K58（B4）：H2。
（四）抵抗力
該菌對熱的抵抗力較其他腸道桿菌強(qiáng)，55℃經(jīng)60分鐘或60℃加熱15分鐘仍有部分細(xì)菌存活。在自然界的水中可存活數(shù)周至數(shù)月，在溫度較低的糞便中存活更久。膽鹽、煌綠等對大腸桿菌有抑制作用。對磺胺類、鏈霉素、氯霉素等敏感，但易耐藥，是由帶有R因子的質(zhì)粒轉(zhuǎn)移而獲得的。
二、致病性
（一）致病物質(zhì)
1．定居因子（Colonizationfactor ,CF）;也稱粘附素(Adhesin)，即大腸桿菌的菌毛。致病大腸桿菌須先粘附于宿主腸壁，以免被腸蠕動和腸分泌液清除。使人類致瀉的定居因子為CFAⅠ、CTAⅡ(Colonization factor antigen Ⅰ、Ⅱ)，定居因子具有較強(qiáng)的免疫原性，能刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體。
2．腸毒素：是腸產(chǎn)毒性大腸桿菌在生長繁殖過程中釋放的外毒素，分為耐熱和不耐熱兩種。
（1）大耐熱腸毒素（Heatlabile enterotoxin, LT）：對熱不穩(wěn)定，65℃經(jīng)30分鐘即失活。為蛋白質(zhì)，分子量大，有免疫原性。由A、B兩個亞單位組成，A又分成A1和A2，其中A1是毒素的活性部分。B亞單位與小腸粘膜上皮細(xì)胞膜表面的GM1神經(jīng)節(jié)苷脂受體結(jié)合后，A亞單位穿過細(xì)胞膜與腺苷酸環(huán)化酶作用，使胞內(nèi)ATP轉(zhuǎn)化cAMP。當(dāng)cAMP增加后，導(dǎo)致小腸液體過度分泌，超過腸道的吸收能力而出現(xiàn)腹瀉。LT的免疫原性與霍亂弧菌腸毒素相似，兩者的抗血清交叉中和作用。
（2）耐熱腸毒素（Heatstable enterotoxin ,ST）：對熱穩(wěn)定，100℃經(jīng)20分鐘仍不被破壞，分子量小，免疫原性弱。ST可激活小腸上皮細(xì)胞的鳥苷酸環(huán)化酶，使胞內(nèi)cGMP增加，在空腸部分改變液體的運轉(zhuǎn)，使腸腔積液而引起腹瀉。ST與霍亂毒素無共同的抗原關(guān)系。
腸產(chǎn)毒性大腸桿菌的有些菌株只產(chǎn)生一種腸毒素，即LT或ST；有些則兩種均可可產(chǎn)生。有些致病大腸桿菌還可產(chǎn)生vero毒素。
3．其他：胞壁脂多糖的類脂A具有毒性，O特異多糖有抵抗宿主防御屏障的作用。大腸桿菌的K抗原有吞噬作用。
（二）所致疾病
1．腸道外感染：多為內(nèi)源性感染，以泌尿系感染為主，如尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎、上行性尿道感染多見于已婚婦女。也可引起腹膜炎、膽囊炎、闌尾炎等。嬰兒、年老體弱、慢性消耗性疾病、大面積燒傷患者，大腸桿菌可侵入血流，引起敗血癥。早產(chǎn)兒，尤其是生后30天內(nèi)的新生兒，易患大腸桿菌性腦膜炎。
2．急性腹瀉：某些血清型大腸桿菌能引起人類腹瀉。根據(jù)其致病機(jī)理不同，分為四種類型。
（1）腸產(chǎn)毒性大腸桿菌（EnterotoxigenicE. coli,ETEC）：引起嬰幼兒和旅游者腹瀉，出現(xiàn)輕度水瀉，也可呈嚴(yán)重的霍亂樣癥狀。腹瀉常為自限性，一般2～3天即愈。營養(yǎng)不良者可達(dá)數(shù)周，也可反復(fù)發(fā)作。致病因素是LT或ST，或兩者同時致病。有些菌株具有定居因子，常見者為O6：K15：H16、O25：K7：H42。鑒定ETEC主要測定大腸桿菌腸毒素，血清型有一定參考意義。
（2）腸致病性大腸桿菌（EnteropathogenicE.coli,EPEC）:是嬰兒腹瀉的主要病原菌，有高度傳染性，嚴(yán)重者可致死；成人少見。細(xì)菌侵入腸道后，主要在十二指腸、空腸和回腸上段大量繁殖。切片標(biāo)本中可見細(xì)菌粘附于絨毛，導(dǎo)致刷狀緣破壞、絨毛萎縮、上皮細(xì)胞排列紊亂和功能受損，造成嚴(yán)重腹瀉。EPEC不產(chǎn)生LT或ST。有人報道，EPEC可產(chǎn)生一種由噬菌體編碼的腸毒素，因?qū)ero細(xì)胞（綠猴腎傳代細(xì)胞）有毒性，故稱VT毒素。VT毒素的結(jié)構(gòu)、作用與志賀氏毒素相似，具有神經(jīng)毒素、細(xì)胞毒素和腸毒素性。鑒定EPEC可根據(jù)臨床表現(xiàn)與血清型。
EIEC的多數(shù)菌株無動力，生化反應(yīng)和抗原結(jié)構(gòu)均近似痢疾桿菌，應(yīng)予注意。EIEC可引起豚鼠角結(jié)合膜炎，臨床上可藉此協(xié)助鑒定EIEC。
（4）腸出血性大腸桿菌（EnterohemorrhagicE.coli,EHEC）:引起散發(fā)性或暴發(fā)性出血性結(jié)腸炎，可產(chǎn)生志賀氏毒素樣細(xì)胞毒素。EHCO的主要菌型是O157：H7，還可有O26、OⅢ等。
表9-2 引起急性腹瀉的大腸桿菌
| 腸產(chǎn)毒性大腸桿菌 | 腸致病性大腸桿菌 | 腸侵襲性大腸桿菌 | 腸出血性大腸桿菌 | |
| 感染部位 | 小腸 | 小腸 | 大腸 | 大腸 |
| 腹瀉類型 | 水瀉 | 水瀉 | 痢疾樣 | 血性腹瀉 |
| 易感人群 | 嬰兒，成人 | 嬰兒 | 成人，兒童 | 各種年齡？ |
| 分布 | 發(fā)展中國家(熱帶) | 世界各地 | 世界各地 | 北美、日本 |
| 流行病學(xué) | 散發(fā)或暴發(fā)嬰兒腹瀉及旅游者腹瀉 | 散發(fā)或暴發(fā)嬰兒腹瀉 | 散發(fā)或暴發(fā)，常見于年齡較大兒童 | |
| 致病機(jī)理 |
LT、ST 定居因子 |
細(xì)胞毒？定居因子 | 侵襲腸粘膜細(xì)胞 | 細(xì)胞毒？ |
| 常見O血清型 | 6、8、15、20、25、27、78、148、159 | 2、26、44、55、86、111、114、119、125、126、127、128、142、146、158 | 28、29、112、124、136、143、144、152、164、167 | O157：H7 |
| 鑒定 | 測定LT、ST、檢出定居因子血清型 | 血清型與臨床表現(xiàn) | 血清型測定細(xì)菌侵襲力 | 血清型 |
此外，腸粘附性大腸桿菌（EnteroadhesiveE.coli,EAEC）也可引起腹瀉，但對其發(fā)病機(jī)理與血清型尚不了解。EAEC不侵入腸上皮細(xì)胞，不產(chǎn)生LT或ST，也無VT毒素。唯一特征是具有與Hep-2細(xì)胞（人喉上皮細(xì)胞癌細(xì)胞系）粘附的能力，故也稱Hep-2細(xì)胞粘附性大腸桿菌。
三、微生物學(xué)檢查法
（一）細(xì)菌的分離鑒定
1．標(biāo)本：腸道外感染取中段尿、血液、膿液、腦脊液等，腹瀉者取糞便。
2．分離培養(yǎng)與鑒定：糞便標(biāo)本直接接種腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基。血液需先經(jīng)肉湯增菌，再轉(zhuǎn)種血瓊脂平板。其他標(biāo)本可同時接種血瓊脂平板和腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基。37℃孵育18～24小時后，觀察菌落并涂片染色鏡檢。采用一系列生化反應(yīng)進(jìn)行鑒定。腸致病性大腸桿菌須先作血清學(xué)定型試驗。必要時檢定腸霉毒素。
泌尿系統(tǒng)除確定大腸桿菌外，還應(yīng)計數(shù)，每毫升尿含菌量≥100，000時，才有診斷價值。
（二）衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查
大腸桿菌不斷隨糞便排出體外，污染周圍環(huán)境和水源、食品等。取樣檢查時，樣品中大腸桿菌越多，表示樣品被糞便污染越嚴(yán)重，也表明樣品中存在腸道致病菌的可能性越大。故應(yīng)對飲水、食品、飲料進(jìn)行衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查。
1．細(xì)菌總數(shù)：檢測每毫升或每克樣品中所含細(xì)菌數(shù)，采用傾注培養(yǎng)計算。我國規(guī)定的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)是每毫升飲水中細(xì)菌總數(shù)不得超過100個。
2．大腸菌數(shù)指數(shù)：指每立升中大腸菌群數(shù)，采用乳糖發(fā)酵法檢測。我國的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)是每1000ml飲水中不得超過3個大腸菌群；瓶裝汽水、果汁等每100ml大腸菌群不得超過5個。
四、防治原則
在腸產(chǎn)毒性大腸桿菌的免疫預(yù)防研究中，發(fā)現(xiàn)其菌毛抗原在自然感染和人工自動免疫中是一種關(guān)鍵性抗原。
參看
 腸道桿菌 | 痢疾桿菌  |
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