乙型肝炎病毒
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乙型肝炎病毒（hepatitis B virus ）簡稱乙肝病毒，HBV。是一種DNA病毒，屬于嗜肝DNA病毒科（hepadnavividae）。根據(jù)目前所知，HBV就只對人和猩猩有易感性，引發(fā)乙型病毒性肝炎疾病。完整的乙肝病毒成顆粒狀，也會被稱為丹娜顆粒（Dane）。1970年由丹娜發(fā)現(xiàn)。直徑為42納米。顆粒分為外殼和核心兩部分。乙型肝炎病毒基因組長約3.2kb ，為部分雙鏈環(huán)狀DNA。HBV 的抵抗力較強，但65℃10 小時 、煮沸10 分鐘 或高壓蒸氣均可滅活HBV。含氯制劑、環(huán)氧乙烷、戊二醛、過氧乙酸和碘伏等也有較好的滅活效果。我國的乙肝病毒感染率約60%-70%；乙肝表面抗原攜帶率約占總?cè)丝诘?.18%，以此計算，全國約有9300萬人攜帶乙肝病毒，其中乙肝患者大約有3000萬。
目錄 |
基本概述
HBV只有3200bp，是一個相當小的病毒。其基因組共有四個ORF，編碼以下一些蛋白：Core蛋白和pre-core蛋白，Pol蛋白，X蛋白，以及S蛋白（L，M，S）。Core是核衣殼蛋白；Pre-core現(xiàn)在不知道有何功能，它對病毒的復制不是必要的，但是可能與抑制宿主的免疫反應(yīng)有關(guān)；X蛋白對病毒復制是重要的，還與肝癌的發(fā)生有關(guān)；S蛋白是病毒的包膜蛋白，與病毒進入細胞有關(guān)。
HBV病毒的生活史
簡單描述一下就是核衣殼-cccDNA-mRNA-rcDNA-核衣殼-組裝釋放。所以實際上HBV是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒，HBV的復制是離不開逆轉(zhuǎn)錄的。
醫(yī)科大學視頻《乙型肝炎病毒》魯鳳民教授主講
基因結(jié)構(gòu)
目前，已可從感染HBV病人的血清中及感染肝臟提純的病毒核心中分離出環(huán)狀雙股DNA，從而確定HBV屬DNA病毒。目前，由于克隆化DNA完整核苷酸已經(jīng)確定，現(xiàn)已證實HBsAg和HBcAg都是由Dane顆粒的DNA所編碼，并且二類基因存在同一DNA分子上。有人比較病毒基因編碼能力和病毒多少，發(fā)現(xiàn)HBV DNA負鏈能編碼全部已知的HBV蛋白質(zhì)，而其正鏈開放讀碼區(qū)，不能編碼病毒蛋白。HBVDNA負鏈有四個開放區(qū)，分別稱為S、C、P及X，能編碼全部已知的HBV蛋白質(zhì)。S區(qū)可分為二部分，S基因和前S基因。S基因能編碼主要表面蛋白。S基因之前是一個能編碼163個氨基酸的前S基因，編碼Pre S1和Pre S2蛋白。C區(qū)基因包括前C基因和C基因，分別編碼HBeAg和HBcAg。P區(qū)最長，約占基因組75%以上，編碼病毒體DNA多聚酶。X區(qū)可能編碼有154個氨基酸的堿性多肽?！ ?/p>
hbv的變異
由于HBV DNA在復制時，有一個逆轉(zhuǎn)錄過程，故易發(fā)生變異
s區(qū)變異可出現(xiàn)表面抗原與表面抗體共存，或者出現(xiàn)表面抗原陰性或表面抗體陰性的慢性乙肝，還可致使乙肝疫苗接種失敗。前c/c區(qū)基因發(fā)生變異，能影響e抗原產(chǎn)生，故檢查e抗原時可呈陰性結(jié)果，此時并不反映hbv復制減少和消失，而且有可能易于引起重癥肝炎。x區(qū)變異可使hbv dna復制下降從而使血清中hbv標志物全部陰性，然而檢測x基因則為陽性。
慢性乙型肝炎的自然史
乙肝病毒的活動受到機體免疫系統(tǒng)的控制，因此總是此消彼長的過程，但是innate和adaptive以及病毒變異的過程是非常復雜的?？偟膩碚f，免疫系統(tǒng)漠視病毒的存在，保持免疫耐受狀態(tài)時是一個免疫平衡；免疫系統(tǒng)強大到控制病毒又是另一個平衡；而雙方反復搏斗的過程就會造成肝臟損傷。
病毒性肝炎，肝纖維化，脂肪肝，酒精肝，藥物性肝損害及肝硬化，肝癌等肝病是當今社會威脅人類健康的主要疾病之一。據(jù)最新統(tǒng)計病毒性肝炎和乙肝病毒攜帶者在我國人群當中有14%以上人口感染。正因為這兩種病毒性肝炎攜帶者在生活當中在親情，愛情，入學，就業(yè)，出國，社交等方面都有不同程度的影響，甚至歧視，許多患者病急亂投醫(yī)，不但沒得到最佳治療效果，反而延誤了治療時間，致使病情加重，發(fā)展到肝纖維化，肝腹水，肝腹化和肝癌的發(fā)生。更有認同“乙肝無治論”之說，使病毒性肝炎乙肝患者失去治療信心，使病毒在體內(nèi)反復復制，產(chǎn)生病變。這也是肝纖維，肝硬化，肝癌的發(fā)病原因。致使每年死于肝硬化，肝癌的患者就有一百多萬人?！ ?/p>
乙型肝炎病毒的傳播途徑
引乙型肝炎的傳播途徑有以下幾種：血源性傳播，醫(yī)源性傳播，母嬰傳播，生殖細胞傳播，密切接觸傳播（性接觸為主），吸血昆蟲（蚊子，臭蟲等）傳播，飲食傳播的可能性很小。
血源性傳播是乙肝的主要傳播途徑。所以預防乙肝主要是嚴格檢查供血者。盡量不使用血液及血制品，特別是進口血液制品?！♂t(yī)源性傳播主要是注射器不消毒重復使用，拔牙用具及其它創(chuàng)傷性醫(yī)療器消毒不嚴而造成傳播。預防應(yīng)嚴格執(zhí)行醫(yī)療制度，增強無菌觀念，實行一人針一用一消毒，是預防乙肝經(jīng)醫(yī)源性傳播的關(guān)鍵?！?/p>
母嬰傳播是通過胎盤傳播和經(jīng)過產(chǎn)道傳播兩種方式實現(xiàn)。乙肝免疫球蛋白可以有效地抑制乙肝母嬰或父嬰的傳播，有效率可達百分之九十以上。
性傳播：乙肝病毒的性傳播是性伙伴感染的重要途徑，這種傳播亦包括家庭夫妻之間的傳播。
密切接觸傳播的幾率較低，有人曾做統(tǒng)計僅為12%，一般的接觸不會傳播乙型肝炎。
其他傳播途徑有吸血昆蟲叮咬，如蚊子，臭蟲等，所以要注意消滅害蟲，防止害蟲叮咬。乙型肝炎飲食傳播的可能性很小，使用公筷和分餐制還是有必要的。
廣泛地接種乙肝疫苗，是預防乙型肝炎的主要方法?！?/p>
消毒處理
乙型肝炎病毒的消毒處理對控制乙型肝炎的傳播具有十分重要的意義。20世紀90年代末研究發(fā)現(xiàn)，乙型肝炎病毒對多種常用的消毒方法均很敏感，如熱力消毒98°C2分鐘即可使乙型肝炎病毒滅活而失去感染性；常用的含氯制劑如0.5%的次氯酸鈉，1分鐘即使乙型肝炎病毒脫氧核糖核聚合酶滅活；而過氧乙酸、環(huán)氯乙烷、碘制劑及戊二醛等，對乙型肝炎病毒的滅活作用既肯定又確切，都極大地充實了乙型肝炎病毒的消毒方法。
高壓蒸汽可以說是殺滅乙型肝炎病毒的既簡便易行又完全徹底的方法。但因許多物品、器材經(jīng)不起高壓蒸汽消毒，故又推薦采用對金屬無腐蝕作用的戊二醛消毒被污染的器械（如電鏡、內(nèi)鏡等），效果相當滿意，但價格昂貴。對不耐高溫的物品的消毒，像疫苗與抗生素等，目前則采用r射線、X線和電子輻射消毒。這些射線能穿透塑料制品的包裝，可達到完全殺滅病毒的止的，但常使人造纖維失去張力，使一些藥品色澤改變，故也難在國內(nèi)推廣。
目前對紡織品、皮毛、塑料制品、文物、小型精密儀器、內(nèi)鏡、監(jiān)護裝置、人工眼球器材等都采用環(huán)氧乙烷蒸氣消毒。而其他常用市售化學消毒劑則可根據(jù)具體情況選用。
常用于殺滅乙型肝炎病毒的化學消毒劑有以下幾種：
（1）氯制劑：如3%的漂白粉、含有效氯250*106的二氯異氰尿酸鈉及氯化磷酸三鈉等，室溫下15分鐘，用于清洗器皿和餐具，消毒效果滿意。
（2）氧化劑：0.2%-0.5%過氧乙酸及15%過氧化氫，在室溫下作用10-30分鐘，可作外科移植物的消毒劑。用于患者餐具的浸泡，可殺滅乙型肝炎病毒。
（3）烷化劑：2%戊二醛，用于手術(shù)器械、電鏡的擦拭消毒，10%甲醛可用于血液制品中乙型肝炎病毒的消毒。
（4）碘化劑：1%碘酊25°C作用15分鐘以上可用于消毒體溫計、各種醫(yī)用導管及牙科器械等。但應(yīng)注意密閉，以免碘升華。消毒后應(yīng)消除表面沾有的碘液。有條件時可選用碘伏（含有效碘200*10-6）則效果更好。而與肝炎患者更密切接觸者，如家屬及醫(yī)護人員，則主張選用肥皂和流水沖洗至少2遍以上，以盡量減少手上皮膚沾染的乙型肝炎病毒，然后再用0.1%-0.5%過氧乙酸或含200*10-6有效碘的碘伏浸泡雙手1-2分鐘?！ ?/p>
乙肝病毒基因檢查的方法有哪些
用于乙肝病毒基因檢查的方法主要有：熒光PCR法、競爭PCR法、PCR酶聯(lián)免疫吸附法、熒光標記物法和PCR酶聯(lián)化學發(fā)光等方法。這些方法各有優(yōu)缺點，所使用的儀器設(shè)備、試劑品質(zhì)源于不同的國家和地區(qū)，設(shè)立的標準曲線以及標準熒光等各不相同，得出的數(shù)值左右漂浮，偏差很大，得出的檢測值范圍也不相同。
乙肝病毒基因檢查的實驗室診斷主要依賴于血清特異性抗原抗體（ELISA）檢測和乙肝病毒基因（HBV-DNA）檢測。ELISA方法一直是臨床診斷HBV感染的傳統(tǒng)手段，反映機體HBV感染的免疫狀態(tài)。而HBV-DNA檢測則是采用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)，特異性擴增乙肝病毒基因組保守的C基因區(qū)上270bp基因片段，以近于2n的指數(shù)（n為循環(huán)次數(shù)），在數(shù)小時內(nèi)可將極微量的HBV-DNA特定的分子片斷擴增至1x107～1x108倍，大大提高了HBV的檢出率，為臨床診斷是否為HBV感染提供了一種強有力的手段?！ ?/p>
三種形態(tài)
感染乙肝病毒的病人血清中有三種不同形態(tài)的顆粒，分別為大球形顆粒(直徑42nm)、小球形顆粒(直徑22nm)和管形顆粒(直徑22nm)。
其中，大球形顆粒又稱Dane顆粒，是1970年Dane首先用電鏡在乙肝病人血清中發(fā)現(xiàn)的。Dane顆粒是有感染性的完整HBV顆粒，呈球形，具有雙層衣殼。外衣殼由來自宿主的脂質(zhì)雙層和包膜蛋白組成，有大約400個HBV表面抗原（HBsAg）即蛋白鑲嵌于脂質(zhì)雙層中。用離子去垢劑如NP-40處理病毒顆粒，去除病毒外衣殼后，暴露出內(nèi)層核心。核心的表面為病毒的內(nèi)衣殼，內(nèi)衣殼蛋白為HBV核心抗原（HBcAg）。HBcAg經(jīng)酶或去垢劑作用后可暴露出e抗原(HBeAg)。核心顆粒中間包裹著雙鏈DNA分子、DNA聚合酶（P蛋白）等。
而小球形顆粒和由小球形顆粒串聯(lián)而成的管形顆粒均由病毒的包膜蛋白構(gòu)成，不含病毒基因組，因而不具有感染性，被稱為亞病毒顆粒。
乙肝病毒抗原及其對應(yīng)抗體
由上可知，HBV的抗原有3種：表面抗原（HBsAg）、核心抗原（HBcAg）和e抗原（HBeAg）。表面抗原大量存在于感染者血液中，是HBV感染以及檢測的主要標志。它具有抗原性，可誘導機體產(chǎn)生特意保護性的抗-HBs，也是制備疫苗的最主要成分。
核心抗原由183個或185個氨基酸組成，高度磷酸化，是乙肝病毒核心顆粒的唯一結(jié)構(gòu)蛋白。正由于它存在于Dane顆粒核心結(jié)構(gòu)表面，被表面抗原覆蓋，故不易在血循環(huán)中檢出。核心抗原具有強免疫原性，可誘導很強的體液免疫和細胞免疫，刺激機體產(chǎn)生抗-HBc。
e抗原為可溶性蛋白質(zhì)，傳染性強，游離存在于血液中，雖然很早就被發(fā)現(xiàn)，在病理上認為是HBV復制以具有強感染性的一個指標，但其功能尚不清楚。抗-HBe的出現(xiàn)，是預后良好的征象。
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